產(chǎn)品說明: 谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px 或 GPX)是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要的過氧化物分解 酶。GPX 能夠催化還原型谷胱甘肽(GSH)生成氧化型谷胱甘肽(GSSG),使有毒的過氧化氫還原成無毒的羥基 化合物。
GPX 催化 H2O2氧化 GSH,產(chǎn)生 GSSG,GSH 能與 DTNB 生成在 412nm 處有特征吸收峰的化合物,412nm 下吸 光度的下降即可反應(yīng) GPX 的活性。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、天平、臺式離心機(jī)、微量玻璃比色皿/96 孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、EP 管。
樣本處理
1、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取 0.05g 組織,加入 1mL 提取液)進(jìn)行冰 浴勻漿。10000rpm,4℃離心 10min,取上清置冰上待測(如上清不清澈,再離心 3min)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量 10 4個(gè):提取液體積(mL)500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)胞加入 1mL 提取液), 冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3s,間隔 7s,總時(shí)間 3 min)然后 10000rpm,4℃,離心 10min,取上 清置冰上待測(如上清不清澈,再離心 3min)。
3、血清(漿)等液體:直接測定。
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